T4 DNA Polymerase

T4 DNA polymeráza katalyzuje syntézu DNA ve směru 5‘→3‘ podle primed ssDNA templátu. Také vykazuje silnou 3‘→5‘ exonukleázovou „proofreading“ aktivitu, 5‘→3‘ exonukleázová aktivita je nulová. Enzym může být použit pro doplnění 5‘ vyčnívajících (protruding) konců značenými či neznačenými dNTP, pro generování tupých konců na DNA s převisem na 3‘ konci nebo pro in vitro mutagenezi. Polymeráza si zachovává aktivitu v mnoha 1X restriktázových pufrech od firmy Promega. Pro úplnou inaktivaci je nutný ohřev na 75 °C po dobu 10 minut. Enzym je dodáván v koncentraci 5-10 U/µl a s 10X reakčním pufrem, který obsahuje 250mM Tris-acetát (pH 7,7), 1M octan draselný, 100mM octan hořečnatý a 10mM DTT.