Proteasome-Glo Chymotrypsin-Like Assay

26S proteazom je 2,5MDa multiproteinový komplex přítomný ve všech eukaryotických buňkách, který se podílí na řízení obratu nepotřebných proteinů. Proteasome-Glo Chymotrypsin-Like Assay je homogenní luminiscenční esej pro měření chymotrypsinové aktivity purifikovaného proteazomu. Esej využívá luminiscenčního prosubstrátu Suc-LLVY-aminoluciferinu, který je po štěpení proteazomovou podjednotkou oxidován rekombinantní Ultra-Glo luciferázou a generuje se luminiscenční signál úměrný aktivitě podjednotky. Prosubstrát je rozpuštěn v optimalizovaném pufru, který zajišťuje maximální aktivitu proteazomových podjednotek i luciferázy. Jednoduchý „add-mix-read“ protokol vyžaduje pouze přidání reagentu k enzymu a krátkou inkubaci a poté je možné přímo měřit signál. Generovaná bioluminiscence je tzv. „glow“ typu s delší dobou dosvitu a je vhodná i pro high-throughput screening v 96 a 384-jamkových destičkách na automatických platformách.