NADP/NADPH-Glo Assay

NADP+/NADPH-Glo Assay je jednoduchá bioluminiscenční lytická esej pro stanovení celkového obsahu redukované a oxidované formy NADP. Esej je založená na redukci proluciferinového substrátu pomocí NADPH-dependentní reduktázy. V prvním kroku je oxidovaná forma NADP+ převedena pomocí cyklovacího enzymu na NADPH. V přítomnosti NADPH je pak proluciferin reduktázou redukován na luciferin, který je následně oxidován Ultra-Glo rekombinantní luciferázou a generuje se bioluminiscence úměrná množství NADH. Pomocí modifikovaného protokolu lze stanovit samostatně i oxidovanou a redukovanou formu kofaktoru. Jednotlivé formy se selektivně inaktivují krátkým zahřátím v kyselém nebo bazickém pH a následně se stanoví každá forma samostatně.