NAD/NADH-Glo Assay

NAD+/NADH-Glo Assay je jednoduchá bioluminiscenční lytická esej pro stanovení celkového obsahu redukované a oxidované formy NAD. Esej je založená na redukci proluciferinového substrátu pomocí NADH-dependentní reduktázy. V prvním kroku je oxidovaná forma NAD+ převedena pomocí cyklovacího enzymu na NADH. V přítomnosti NADH je proluciferin reduktázou redukován na luciferin, který je následně oxidován Ultra-Glo rekombinantní luciferázou a generuje se bioluminiscence úměrná množství NADH. Pomocí modifikovaného protokolu lze stanovit samostatně i oxidovanou a redukovanou formu. Jednotlivé formy kofaktoru se inaktivují krátkým zahřátím v kyselém nebo bazickém pH a následně se stanoví každá forma samostatně.