LDH-Glo™ Cytotoxicity Assay

LDH-Glo je bioluminiscenční esej pro sledování cytotoxického působení látek. Je založená na detekci laktát dehydrogenázy (LDH), která je uvolňována z buněk s narušenou cytoplazmatickou membránou. Uvolněná LDH oxiduje laktát obsažený v médiu za redukce NAD+ na NADH. NADH je pak využito ve spřažené enzymové reakci enzymem reduktázou, která proton převádí na proluciferin a přemění ho na luciferin. Luciferin je pak v posledním kroku oxidován Ultra-Glo luciferázou a generuje se bioluminiscence úměrná množství LDH uvolněné do média.

Esej má vysokou citlivost a pro stanovení stačí odebrat z každé jamky jen malé množství média (2–5 µl). Lze tak použít pro semikinetickou analýzu, stanovit více časových bodů z jediné jamky a buňky po skončení experimentu použít pro další analýzu. Esej lze kombinovat s dalšími spektrálně kompatibilními buněčnými esejemi a je vhodná i pro 3D kultury.