AMP-Glo Assay

AMP-Glo je homogenní bioluminiscenční esej pro stanovení množství AMP vznikajícího v jakékoliv biochemické reakci. Lze využít pro měření aktivity širokého spektra enzymů jako jsou cAMP specifické fosfodiesterázy, aminoacyl-tRNA syntetázy, DNA ligázy, ubikvitin ligázy nebo enzymů modulovaných AMP. Stanovení probíhá ve dvou krocích. V prvním kroku je zastavena reakce, při které vzniká AMP, vyčerpá se všechno zbývající ATP a vzniklé AMP je konvertováno na ADP. Přidáním druhého reagentu je ADP konvertováno na ATP, které se spotřebovává v luciferázové reakci a generuje se stabilní bioluminiscence úměrná množství vzniklého AMP.

Díky stabilitě signálu lze esej použít i pro high-throughput stanovení velkého množství vzorků v 96 a 384-jamkových destičkách. AMP-Glo má široký dynamický rozsah a produkuje signál i při nízké konverzi substrátu, což umožňuje screening enzymů s nízkou aktivitou. Esej generuje minimum falešně pozitivních výsledků a Z‘-faktor > 0,7.