logo-east-port-life-science-2011

Vyhledávání:


Doprava v ČR, manipulace suchý led ZDARMA find-us-on-facebook
YouTube
 
 
 

Nucleofector

 

Lonza Cologne AG - Amaxa® Nucleofector® technologie

 

 

Lonza Cologne AG, jako světový leader v transfekčních technologiích, se věnuje zvýšení kvality a rychlosti základního a farmaceutického výzkumu v genovém transferu, umlčování genů a genetické medicíně. Amaxa® Nucleofector® technologie je první účinnou ne-virovou metodou pro transfer DNA nebo siRNA přímo do jádra primárních buněk nebo těžko transfekovatelných buněčných linií. Technologie je založená na elektroporaci a využívá nové a unikátní elektrické parametry generované speciálním Nucleofector® zařízením. Tyto jsou kombinované s různými reagenciemi specifickými pro buněčný typ. Amaxa je celosvětová leader v transfekci primárních buněk.

 

Lonza Cologne AG, dříve známa pod jménem Amaxa, je nyní součástí skupiny LONZA. Svou Nucleofector® technologií výborně doplňuje portfolio firmy Lonza, především v oblasti buněčného výzkumu.

 


 

Nový, zdokonalený 4D Nucleofector® systém nabízející multi-dimenzionální možnosti

 

S přispěním znalostí a zkušeností zákazníků  vyvinuli výzkumní pracovníci firmy Lonza nový, inovativní 4D Nucleofector® systém. Systém je navržen s důrazem na maximální flexibilitu a umožňuje Nukleofekci® buňek v několika formátech spolu se zlepšeným výkonem a maximálním ohledem na jednotlivé buněčné typy.

Nový 4D Nucleofector® je modulární systém tvořený z Centrální jednotky - Core Unit a X panelu - X Unit, což je první dostupná funkční jednotka. Jednotlivé jednotky se mohou skládat ve vertikálním či horizontálním směru. Vzhledem k modulárnímu navržení je 4D Nucleofector® velice flexibilní s ohledem k podporovaným funkcím a dalším možnostem do budoucna. Operační software umožňuje navrhnout a uložit individuální nastavení pokusů. Navíc je dostupný software pro PC, ve kterém je možné jednotlivé programy navrhnout a následně jen nahrát do centrální jednotky pomocí USB portu.

4D Nucleofector

Největší přínosy nového 4D Nucleofector® systému:

 

Užití různého počtu buněk pro různé aplikace

  • společný protokol pro transfekci 100µl a 20µl
  • 100µl kyveta Nucleocuvette® pro vysoké počty buňek, až 2 x 107
  • 20µl kyvetový strip Nucleocuvette® Strip pro menší počty buněk, od 2 x 104 

 

Stejné podmínky pro různé počty  buněk

X jednotka 4D Nucleofector systému může pracovat s dvěma kyvetami vybavenými elektrodami z vodivého polymeru. Díky použití stejného materiálu jako v případě 16 jamkových stripů je tak možné použít stejné protokoly pro různé množství buněk

 

Práce s různým množství vzorků

  • flexibilní volba od 1 do 16 vzorků
  • paralelní zpracování jedné nebo dvou kyvet
  • možnost předprogramovat nastavení pro 50 jednotlivých 100µl Nucleocuvette® nebo jednoho 20µl Nucleocuvette® Strip
  • cena kitu dle množství Vašich vzorků

       4D kyvety    4D open

Transfekce různých druhů primárních buněk

  • pouhých 5 kitů k transfekci všech druhů primárních buněk
  • nový optimalizační kit pro primární buňky, jež zatím nemají vlastní optimalizovaný protokol
  • jednoduchá optimalizace různých buněčných linií za použití 96 jamkového přípojného formátu -96-well Shuttle Add-on Device

 

Zachování funkčnosti buněk

  • adherentní Nukleofekce® neuronů v pozdních vývojových stádiích
  • díky elektrodám z vodivých polymerů nehrozí uvolnění kovových iontů

 

Nukleofekce adherentních buňek

Elektroporačními metodami bylo doposud možné transfekovat pouze buněčné suspenze. Díky 4D-Nucleofector® systému nyní vstupujeme do nové éry, v níž je možná Nukleofekce®  adherentních buněk. Buňky pocházející z pevných tkání (jako například endoteliální buňky, buňky epitelu či neuronů), které obyčejně rostou ve vzájemném kontaktu, a mohou být uchovány a transfekovány ve svém fyziologickém stavu.

Basic Neuron Nucleofector® AD Kit je první svého druhu tím, že umožňuje Nukleofekci® primárních neuronových adherentních buněk. V kitu je použit speciální 16-well Nucleocuvette® AD strip, modifikovaná verze běžně dostupných stripů pro 16 vzorků.


Ilustrační video naleznete zde

 

Zde můžete stáhnou kompletní brožuru k Amaxa® Nucleofector® systému

 

4D-Nucleofector™ System


4D-Nucleofector™ Y unit - k transfekci adherentních buněk

 

 

384-well Nucleofector™ device k transfekci velkého množství vzorků

 

 

 


 

Nucleofector® II

Technologie Nucleofector je vysoce účinná ne-virová metoda pro transfekci. Je založena na dvou částech: přístroj Nucleofector, který poskytuje unikátní elektrické parametry, a Nucleofector kit, který obsahuje roztoky specifické pro buněčný typ.

 

Pro primární buňky je Nucleofector technologie rychlejší, levnější a méně riskantní než metoda virové transdukce, dnes běžně využívaná.

 

Nucleofector technologie je vynikajícím zlepšením dobře známých elektroporačních zařízení. Patentovaná Nucleofector technologie je kombinací optimalizovaných elektrických parametrů a roztoků specifických pro buněčné typy. Tato kombinace umožňuje zasádní krok: doručení DNA přímo do jádra. Jelikož DNA rychle dosáhne jádra, exprese může začít bez zpoždění. Transformované buňky jsou připravené pro analýzu po krátké inkubační době trvající jen 2-4 hodiny. Maximální efektivita je v časovém horizontu 2-16 hodin.

NucleofectorII

 

Elektrické parametry Nucleofectoru jsou odlišné od ostatních komerčně dostupných elektroporačních zařízení. Každé elektrické nastavení je zobrazováno jako určitý program, který byl přizpůsoben pro potřeby určitého buněčného typu. Jelikož je nastavení předprogramováno v přístroji, optimalizace elektrických parametrů uživatelem není potřeba.

 

V současné době je na trhu druhá generace Nucleofector hardware - Nucleofector II. Poskytuje například větší grafický display a nový motorový karusel pro jednodušší manipulaci a větší pohodlí. Možnost ukládání individuálních programů pro optimalizované buněčné linie také zajišťuje větší flexibilitu v uživatelském nastavení.

 

Zařízení váží jen 2,6 kg a jednoduše pasuje pod sterilní kryt, což velmi usnadňuje sterilní práci s buňkami.

 

Dostupné jsou dva typy přístrojů: Nucleofector, který pracuje s jednotlivými kyvetami pro standardní aplikace a nový Nucleofector 96-well Shuttle System, navržený pro high throughout transfekci.

 

Ilustrační video najdete zde!

 

Nucleofector® 96-well Shuttle System 

96 well shuttle

 

Systém pro vysoce efektivní transfekci primárních buněk a těžko transfekovatelných buněčných linií v 96 jamkovém formátu. Systém se skládá ze tří částí, 96 jamkového Shuttle, Nucleofector II přístroje a laptopu. Přístroj může dopravit DNA přímo do jádra, což umožňuje efektivně transfekovat nedělící se primární buňky (jako jsou klidové T buňky a neurony). Doručení siRNA do cytoplazmy se děje s 99% efektivitou.

Optimální podmínky pro transfekci závisí na individuálním  buněčném typu, ne na substrátu, který se transfekuje. To znamená, že identické podmínky jsou použity pro nukleofekci DNA, siRNA nebo shRNA vektorů, takže je velice jednoduché měnit substráty nebo ko-transfekovat DNA i RNA dohromady.

Výhody:

  • Vysoká efektivita
    • Až 95% transfekční efektivita s DNA kombinovaná s viabilitou >95%
    • Až 99% siRNA duplex transfer dokonce i v suspenzních kulturách
  • Vysoká reproducibilita
    • Malé intra- a inter-destičkové standardní odchylky
    • Žádné okrajové jevy a lot-to-lot rozdíly
  • Přístup k těžko transfekovatelným buněčným typům
    • Neurony, T buňky a další těžko transfekovatelné buněčné typy mohou být transfekovány
  • Jednoduché na použití
    • Optimalizované 96 jamkové kity a protokoly pro mnoho primárních buněk a buněčných linií
  • Substrátová flexibilita
    • Identické transfekční podmínky pro DNA, siRNA, shRNA, miRNA ...
  • Transfekční flexibilita
    • Až 96 nezávislých programů může běžet na destičce
    • Různé buněčné množství - od 104 - 106 buněk na reakci
  • Rychlá optimalizace
    • Optimalizace jakékoli těžko transfekovatelné buněčné linie už na jedné destičce
  • Bezpečnost
    • Destičky na jedno použití minimalizují risk kros-kontaminace
    • Nový vodivý polymer - žádné uvolňování kovových iontů
  • HTS kompatibilita
    • Automatické zpracování 96 jamkové destičky za 3-4 minuty
    • Splňuje předpoklady pro Liquid Handling integraci

Ilustrační video najdete zde!

 

 
 
© 2010 East Port Praha s.r.o & nebrat s.r.o.

Přihlášení: