
Společnost Promega představuje kompletní řadu systémů pro detekci apoptózy. Nabízíme řešení a uspokojíme potřeby prakticky každého z Vás, kdo se zabývá studiem programované buněčné smrti - apoptózy. K dispozici jsou systémy pro detekci časných, středních i pozdních stádií apoptózy.
Fragmentace DNA (fluorescenční i kolorimetrické TUNEL systémy)
Aktivní kaspázy (stanovení pomocí mikrodestičkových readerů - fluorescence i viditelné spektrum z buněčných kultur či buněčných extraktů)
Protilátky (imunohistochemické a imunocytochemické stanovení aktivních kaspáz, mitochondriálních změn, přežívání atd.)
Caspase-Glo® 3/7 Assay Systém (G8090, G8091, G8092 a G8093)
Caspase-Glo® 8 Assay Systems (G8200, G8201 a G8202)
Caspase-Glo® 9 Assay Systems (G8210, G8211 a G8212)
Apo-ONE® Homogeneous Caspase-3/7 Assay (G7790 a G7791)
CaspACE™ FITC-VAD-FMK In Situ Marker (G7461 a G7462)
Inhibitor kaspázy Z-VAD-FMK (G7231)
Inhibitor kaspázy Ac-DEVD-CHO (G5961)
Anti-ACTIVE® Caspase-3 pAb (G7481)
Anti-PARP p85 Fragment pAb (G7341)
CaspACE™ Assay System, Colorimetric (G7220 a G7351)
CaspACE™ Assay System, Fluorometric (G3540)
DeadEnd™ Colorimetric TUNEL System (G7130 a G7360)
DeadEnd™ Fluorometric TUNEL System (G3250)
Anti-pS473 Akt pAb (G7441)
Anti-Cytochrome c mAb (G7421)
Death Check™ I Systémy (G7370, G7380 a G7390)
Ceny všech uvedených produktů najdete podle katalogových čísel zde!
Velice užitečným pomocníkem pro všechny z Vás, kdo se apoptózou zabývají může být náš Apoptosis Assistant
Caspase-Glo® 3/7 Assay Systém (G8090, G8091, G8092 a G8093)
The Caspase-Glo® 3/7 Assay poskytuje homogenní luminiscenční test měření aktivity kaspáz 3/7. Systém poskytuje proluminiscenční substrát kaspázy 3/7 DEVD- aminoluciferin a odpovídající termostabilní luciferázu v pufru optimalizovaném pro aktivitu kaspázy 3/7, luciferázy a lýzy buněk.
Jednodušší stanovení apoptózy či aktivity kaspáz (add & mix & read formát)
Vyšší citlivost (v porovnání s kolorimetrickými a fluorescenčními metodami)
Úspora času (0,25 až 1 hodina)
Prodloužená stabilita luminiscenčního signálu (netřeba injektorů)
Multiplexing (možnost kombinace metody s ostatními CBA systémy od Promegy)
Caspase-Glo® 8 Assay Systems (G8200, G8201 a G8202)
The Caspase-Glo® 8 Assay poskytuje homogenní luminiscenční test měření aktivity kaspáz 8. Systém poskytuje proluminiscenční substrát kaspázy 8 a odpovídající termostabilní luciferázu v pufru optimalizovaném pro aktivitu kaspázy 8, luciferázy a lýzy buněk.
Jednodušší stanovení apoptózy či aktivity kaspáz (add & mix & read formát)
Vyšší citlivost (v porovnání s kolorimetrickými a fluorescenčními metodami)
Úspora času (0,25 až 1 hodina)
Prodloužená stabilita luminiscenčního signálu (netřeba injektorů)
Multiplexing (možnost kombinace metody s ostatními CBA systémy od Promegy)
Caspase-Glo® 9 Assay Systems (G8210, G8211 a G8212)
The Caspase-Glo® 9 Assay poskytuje homogenní luminiscenční test měření aktivity kaspáz 9. Systém poskytuje proluminiscenční substrát kaspázy 9 a odpovídající termostabilní luciferázu v pufru optimalizovaném pro aktivitu kaspázy 9, luciferázy a lýzy buněk.
Jednodušší stanovení apoptózy či aktivity kaspáz (add & mix & read formát)
Vyšší citlivost (v porovnání s kolorimetrickými a fluorescenčními metodami)
Úspora času (0,25 až 1 hodina)
Prodloužená stabilita luminiscenčního signálu (netřeba injektorů)
Multiplexing (možnost kombinace metody s ostatními CBA systémy od Promegy)
Apo-ONE® Homogeneous Caspase-3/7 Assay (G7790 a G7791)
Systém obsahuje všechny potřebné reagencie pro rychlé a citlivé fluorometrické stanovení aktivních kaspáz 3 a 7 v homogenním formátu. Množství generovaného fluorescenčního produktu (rhodamin 110) je reprezentativní množství aktivních kaspáz 3/7 ve vzorku.
Rychlost (krátká inkubace - výsledky v průběhu 1 hodiny)
Jednoduchost (homogenní "add, mix, read" formát)
Citlivost (200 apoptických buněk ve 40 000 buněk na jamku)
Flexibilita (poměr reagencie a buněčné kultury 1:1)
Selektivita (substrát Z-DEVD-Rhodamin v patentovaném pufru je selektivní pro aktivní kaspázy 3 a 7)
CaspACE™ FITC-VAD-FMK In Situ Marker (G7461 a G7462)
CaspACE™ FITC-VAD-FMK In Situ Marker je FITC konjugát inhibitoru kaspáz VAD-FMK. Volně prostupuje do buněk, kde se ireverzibilně váže na aktivní kaspázy. Umožňuje tak přímou in situ detekci aktivity kaspáz s použitím jediné reagencie.
Rychlost (výsledky po 30 minutách po přidání markeru)
Jednoduchost (přidání markeru, inkubace, promytí a měření fluorescence)
Univerzálnost (fluorescenční mikroskopie a průtoková cytometrie; vhodné pro duální značení)
In Situ marker apoptózy
Inhibitor kaspázy Z-VAD-FMK (G7231)
Inhibitor kaspázy Z-VAD-FMK je ireversibilní do buněk volně propustný pan- kaspázový inhibitor. Dodává se v DMSO (20mM) pro snadné přidání do buněčných kultur a extraktů. Předpokládaná koncentrace pro použití pro model anti-Fas mAb ovlivněných Jurkat buněk je 20µM.
Inhibitor kaspázy Ac-DEVD-CHO (G5961)
Inhibitor kaspázy Ac-DEVD-CHO je inhibitor aktivity kaspázy 3/7 a je dodáván v koncentraci 10 mM v DMSO pro snadné přidání do buněčných kultur a extraktů. Koncentrace inhibitoru potřebná pro inhibici kaspázové aktivity musí být určena empiricky pro každý systém zvlášť. Výsledky ukazují, že 10µM koncentrace inhibitoru je účinná pro inhibici kaspázové aktivity v extraktu apoptických buněk THP-1.
Anti-ACTIVE® Caspase-3 pAb (G7481)
Anti-ACTIVE® Caspase-3 pAb je navržen k použití jako marker apoptózy. Specificky barví apoptické buňky aniž by barvil buňky neapoptické. Kaspáza 3 hraje nejdůležitější roli v navozování apoptózy a je nejvíce studovanou kaspázou. Anti-ACTIVE® Caspase-3 rabbit pAb je směřována proti neo-epitopu formovaném na C-konci fragmentu p17 vyskytujícím se v aktivní formě kaspázy 3.
Podporovaná aplikace - Imunocytochemie (1:250)
Specifičnost (kaspáza 3 člověka a myši)
Imunogen (peptid odvozený od p17 fragmentu kaspázy 3 mající sekvenční homologii u člověka, myši, potkana a křečka)
Typ protilátky (afinitně purifikovaná králičí polyklonální protilátka dodávaná v Dulbeccově PBS pufru)
Anti-PARP p85 Fragment pAb (G7341)
Anti-PARP p85 Fragment pAb je specifická pro 85kDa fragment poly(ADP-ribose) polymerase (PARP) vznikajícího štěpením intaktní 116 kDa molekuly kaspázou. Nerozpozná intaktní neštěpenou molekulu PARP proteinu. Detekuje časná stádia apoptózy předcházející fragmentaci DNA.
Podporovaná aplikace - Imunobarvení (1:100), Western blotting (1:400 až 1:1 000)
Specifičnost (p85 fragment)
Universálnost (vhodná pro duální technologie - spolu s TUNEL testem nebo dalšími, např. fluorescenčně značenými protilátkami)
Imunogen (N-konec peptidu p85 fragmentu PARP)
Typ protilátky (afinitně purifikovaná králičí polyklonální protilátka dodávaná v Dulbeccově PBS pufru)
CaspACE™ Assay System, Colorimetric (G7220 a G7351)
Systém obsahuje substrát kaspázy 3/7 značený chromoforem p-nitroanaline (pNA) a ireversibilní buňkami propustný pan-kaspázový inhibitor Z-VAD-FMK. Umožňuje citlivé kvantitativní stanovení proteázové aktivity kaspázy 3 - indikátoru procesu apoptózy. pNA se uvolňuje ze substrátu účinkem jeho štěpení kaspázou 3. Množství žlutého barviva (405nm) je proporcionální aktivitě kaspázy 3 přítomné ve vzorku.
Buňkami propustný inhibitor (součástí systému)
Praktičnost (stanovení apoptózy pomocí standardního mikrodestičkového spektrofotometru)
Vysoká obsažnost systému (1,25 mg Ac-DEVD-pNA substrátu a 1,45 mg Z-VAD-FMK inhibitoru)
CaspACE™ Assay System, Fluorometric (G3540)
Systém obsahuje dva substráty značené fluorochromem AMC a dva selektivní reversibilní aldehydické inhibitory umožňující citlivé kvantitativní stanovení proteázové aktivity kaspáz 1 (ICE) a 3 (CPP32). AMC uvolněný z těchto substrátů po jejich štěpení produkuje žlutozelenou fluorescenci (ex. 360nm, em. 460nm), která je monitorována a je proporcionální aktivitě kaspázy 1 nebo 3 ve vzorku.
Citlivost (10 až 20 x citlivější než kolorimetrický formát)
Selektivita (rozlišuje mezi aktivitou kaspázy 1 a 3)
Univerzálnost (detekuje aktivitu kaspáz 1 a 3 v purifikovaných enzymatických preparátech i buněčných extraktech)
Rychlost (test je kompletní již v průběhu 90ti minut)
DeadEnd™ Colorimetric TUNEL System (G7130 a G7360)
DeadEnd™ Colorimetric TUNEL System je test pro snadnou a přesnou detekci apoptických buněk in situ na úrovni jednotlivé buňky. Systém měří fragmentaci DNA u širokého spektra buněk a typů tkání na principu modifikovaného TUNEL testu. V průběhu testu se apoptické buňky barví tmavohnědě (DAB).
Kolorimetrická detekce (umožňuje detekci apoptózy v tenkých a silných sekcích tkání a buněk souběžně se stanovením buněčné morfologie)
Praktičnost (zahrnuje DAB substrát a H2O2 pro barevnou detekci a plastiková krycí sklíčka pro jednodušší manipulaci se vzorky)
Univerzálnost (detekuje apoptózu u širokého spektra buněk a tkání)
DeadEnd™ Fluorometric TUNEL System (G3250)
DeadEnd™ Fluorometric TUNEL System je fluorescenční TUNEL test pro jednoduché, přesné a rychlé stanovení apoptických buněk na úrovni jedné buňky. Systém měří apoptickou fragmentaci DNA přímo inkorporací Fluorescein 12-dUTP na 3´OH konec DNA pomocí TdT, což vytváří polymerické ocásky. Značená DNA pak může být vizualizovaná fluorescenčním mikroskopem, nebo kvantifikována pomocí průtokové cytometrie.
Vysoká obsažnost systému (60 testů po 50µl)
Jednoduchost (přímá inkorporace fluorescenčních nukleotidů eliminuje krok inkubace a šetří Váš čas)
Univerzálnost (detekuje apoptózu u širokého spektra buněk a tkání)
Praktičnost (zahrnuje plastiková krycí sklíčka pro jednodušší manipulaci se vzorky)
Anti-pS473 Akt pAb je polyklonální protilátka vyvinutá proti jednoduše fosforylované Ser473 oblasti C konce proteinu Akt-1. Protilátka je selektivní pro Ser473-fosforylovanou izoformu Akt. Je použitelná pro aplikace v oblastech imunocytochemie a Western blottingu.
Specifičnost (rozpozná pouze fosforylované Akt izoformy; krosreaktivita - člověk, potkan, myš)
Podporované aplikace (Western blotting - 1:2 500, Imunocytochemie - 1:50 a imunohistochemie - 1:50)
Vysoká obsažnost (vytváří až 100 ml roztoku pro Western blotting při použití doporučeného ředění)
Imunogen (peptid odvozený od fosforylované Ser473 oblasti C konce proteinu Akt-1)
Typ protilátky (afinitně purifikovaný králičí IgG dodávaný v PBS obsahujícím 50µg/ml gentamicinu)
Cytochrom c je důležitá molekula v procesu apoptózy. Cytochrom c se přemisťuje z mitochondrie do cytoplazmy, kde asociuje s dalšími proteiny indukujícími apoptózu a aktivuje kaspázu 9. Anti-Cytochrome c mAb je speciálně navržena pro imunofluorescenční studie. V případě imunocytochemie a Jurkat buněk lze u zdravých buněk pozorovat lokalizaci barviva v místech odpovídajících výskytu mitochondrií v buňce. Po indukci apoptózy lze u buněk pozorovat difůzi barviva do cytoplazmy.
Specifičnost (nativní forma cytochromu c - člověk, potkan, myš)
Podporované aplikace (Imunocytochemie - 1:1 000 a imunohistochemie - 1:1 000)
Imunogen (cytochrom c potkana)
Typ protilátky (myší monoklonální IgG - klon 6H2.B4 dodávaný v koncentraci 1 mg/ml v PBS obsahujícím 50µg/ml gentamicinu
Death Check™ I System obsahuje CaspACE™ Assay System, Colorimetric a DeadEnd™ Colorimetric TUNEL System čímž poskytuje kompletní informaci o apoptóze a může být použit pro monitoring apoptózy in vivo v buněčné populaci a in situ v individuálních buňkách.
Death Check™ II System obsahuje DeadEnd™ Colorimetric TUNEL System a CellTiter 96® AQueous One Solution Cell Proliferation Assay. Kombinace obou testů v systému je ideální pro rychlé stanovení viability buněk v populaci následované precizním stanovením apoptózy na úrovni jednotlivých buněk.
Death Check™ III System obsahuje CellTiter 96® AQueous One Solution Cell Proliferation Assay a CaspACE™ Assay System, Colorimetric. Kombinace obou testů v systému je ideální pro rychlé stanovení viability buněk v populaci a následné stanovení aktivity kaspáz v buněčné populaci.
Praktičnost (dvě metody pro stanovení buněčného umírání a apoptózy)
Úspornost (levnější varianta ve srovnání s nákupem jednotlivých reagencií či kitů)